ХИМИЧЕСКОЕ РАСЩЕПЛЕНИЕ [В САЙТАХ] ОШИБОЧНЫХ НУКЛЕОТИДОВ

Метод идентификации точковых мутаций в молекуле ДНК, заключается в смешении меченой денатурированной ДНК дикого типа с избытком денатурированной мутантной ДНК с последующим отжигом - в сайте мутации в образующемся гибридном дуплексе появляется участок с неспаренными основаниями (“mismatch”); дуплекс обрабатывается гидроксиламином и тетраоксидом осмия (соответственно, реагируют с неспаренными цитозином и тимином), что делает эти сайты чувствительными к расщеплению пипередином; разделение вариантов проводят путем электрофореза; применение метода ограничивается сложностью процедуры и использованием токсичных химикатов; методХ.р.о.н.разработан Р.Коттоном с соавт. в 1988.